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qPCR荧光定量的基本原理就是在PCR扩增过程中，随着PCR循环数的递增，PCR产物不断积累，荧光信号也会相应的增加，这样就可以通过荧光强度的变化来对PCR反应进行实时的监测。通过对DNA或RNA的荧光定量PCR监测，实现基因的相对定量、定量和定性分析。qPCR荧光定量的生产工艺：产品品质与生产工艺密不可分，先进的制造工艺和高精度设备是产品品质的前提，PCR实验特别注重PCR材料的管壁厚度，需要超薄且管壁厚度均匀性非常一致，以保证加热模块的热量均匀地传导给PCR管内样品，实现...
gibco澳洲胎牛血清源自洁净的澳洲，从血源采集、加工到质检，整个过程遵循行业高标准，确保高产品品质。澳洲是天然的理想血源地，每批牛血清均经过严格的质量控制和理、化、微生物指标的分析检测，品质可靠，适用于常规培养及原代细胞的培养。gibco澳洲胎牛血清是指在健康母牛正常分娩前采集胎牛血液加工而成的血清，由于血清采集时间早，其胎球蛋白较多，血清白蛋白含量高，而γ-球蛋白含量极低，并富含多种生长因子，因此，是培养细胞为优质的牛血清。牛血清的成分复杂，主要包含蛋白质、多肽、激素、氨...
流式细胞术检测细胞凋亡(AnnexinV/PI法)FlowDetectionofApoptosisbyAnnexinV/PI摘要：磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine，PS)又称复合神经酸，位于正常细胞膜的胞质一侧，在细胞凋亡早期，PS可从细胞膜胞质侧翻转到细胞膜外表面。基于此现象，利用Ca2+依赖性AnnexinV可与PS特异性结合，且亲和力高，适用于细胞凋亡早中期的检测。PI为一种核酸染色剂，与细胞核结合将细胞核染为红色。PI不可透过正常的细胞膜，可透过凋亡...
摘要：细胞增殖是生物体的重要生命特征，细胞以分裂的方式进行增殖。研究细胞增殖，对于理解细胞发育和分化，探索肿瘤发生和治疗，以及评估细胞健康状况和药物安全性评价等都具有重要意义。在检测细胞增殖的多种方法中，直接测定DNA合成是一种敏感并高精度的分析方法。5-溴-脱氧尿嘧啶核苷(Bromodeoxyuridine，BrdU)，是一种胸腺嘧啶核苷的类似物。当细胞处于细胞周期中的DNA合成期(S期)时，BrdU可以掺入到新合成的DNA中。利用抗BrdU的单克隆抗体荧光染色，就可通过流...
摘要：人外周血是容易获取的人体样本，在医学类科研工作中至关重要。如何大化、高效地观察和利用有限的人外周血标本，通过一次实验检测得到更多的结果指标，对现有的实验研究意义重大。因此本文主要描述如何进行25色流式检测及介绍相关分析方法，通过对单个细胞同时检测25个参数，可以实现对外周血各种免疫细胞亚群的全景式描述，以及对某种细胞亚群的深度表型分析。关键词:人外周血,亚群分类,25色流式分析材料与试剂材料：15ml离心管(Corning,catalognumber:430791)10...
流式细胞术（flowcytometery）是利用流式细胞仪（flowcytometer）对快速直线流动状态中的单列细胞或生物颗粒等进行逐个、多参数、快速的定性、定量分析或分选的技术，具有检测速度快、测量参数多、采集数据量大、分析信息全面、分选纯度高、方法灵活等特点，可用于细胞大小、细胞颗粒度、DNA及RNA含量、蛋白质含量、细胞特异抗原、细胞活性、胞内PH值、细胞周期、细胞凋亡、细胞功能分析等的检测。自20世纪70年代以来，随着流式细胞水平的日益提高，该技术已被广泛应用于细胞...
胰酶是一种解离试剂，本质是可以降解蛋白的酶，生物学实验中常用来把贴壁细胞从贴壁面解离下来和使细胞解聚，也可以用于原代细胞的传代过程中分散组织。为什么收到的胰酶会有颜色差异？商品化胰酶溶液需要用干冰运输，在运输过程中，胰酶溶液中的二氧化碳与干冰挥发的二氧化碳可能会极少部分的气体交换，导致溶液PH的漂移。有些胰酶溶液里含有酚红作为PH值指示剂，因此胰酶PH的变化是肉眼可观察到的。由干冰运输过程中导致的PH值的变化很小，溶液呈淡红色；PH值6.8左右时呈淡黄色的。因此胰酶颜色的变化...
细胞冻存和复苏操作步骤：细胞冻存和复苏采取“慢冻快融”的原则，慢速冷冻可使细胞内的水份渗出细胞外，减少细胞内形成冰晶的机会，快融以保证细胞外结晶快速融化，避免慢速融化水份渗入细胞内，再次形成胞内冰晶造成对细胞的损伤。（一）细胞冻存1.配制含的细胞冻存液，预冷（新鲜配制的冻存液会产生大量的热）；2.取对数生长期的细胞，用细胞消化酶将单层生长的细胞消化下来；悬浮细胞则直接将细胞收集到离心管中；3.离心；4.去除上清液，逐渐加入适量预冷的细胞冻存液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，计数，...
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