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技术文章
  • 25 2019-11
    荧光定量的原理与检测 

    荧光定量的原理:荧光定量是在常规PCR基础上加入荧光标记探针或相应的荧光染料来实现其定量功能的。其原理:随着PCR反应的进行,荧光定量反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线图。一般而言,荧光扩增曲线可以分成三个阶段:荧光背景信号阶段,荧光信号指数扩增阶段和平台期。在荧光背景信号阶段,扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖,无法判断产物量的变化。而在平台期,扩增产物已...

  • 22 2019-11
    流式细胞术实验手册

    流式细胞术(flowcytometery)是利用流式细胞仪(flowcytometer)对快速直线流动状态中的单列细胞或生物颗粒等进行逐个、多参数、快速的定性、定量分析或分选的技术,具有检测速度快、测量参数多、采集数据量大、分析信息全面、分选纯度高、方法灵活等特点,可用于细胞大小、细胞颗粒度、DNA及RNA含量、蛋白质含量、细胞特异抗原、细胞活性、胞内PH值、细胞周期、细胞凋亡、细胞功能分析等的检测。自20世纪70年代以来,随着流式细胞水平的日益提高,该技术已被广泛应用于细胞...

  • 18 2019-11
    如何解冻sigma试剂血清才不会使产品质量受损

    如何解冻sigma试剂血清才不会使产品质量受损sigma试剂血清取自出生24小时之内的新生牛,血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。sigma试剂血清含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能,其作用如下:1.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,...

  • 15 2019-11
    胎牛血清

    一、胎牛血清各项质量指标符合2005版《中华人民共和国药典》第三部附录的要求。1、性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。2、蛋白质含量3.5%~5.0%(w/v)3、血红蛋白含量≤0.02%(w/v)4、无菌检验阴性5、支原体检验阴性6、细菌内毒素≤5(EU/ml)7、牛腹泻病毒阴性8、大肠杆菌噬菌体阴性9、支持细胞增殖(Sp2/0-Ag14)生长曲线(接种浓度)大增殖浓度≥2.5×106个/ml细胞倍增时间≤15h克隆率≥85%血清的主要成分编辑血清是由血浆去除纤...

  • 13 2019-11
    一文看懂线粒体膜电位、线粒体质量、线粒体ROS检测染料及其优缺点

    原创:niwanmao流式中文网昨天线粒体是细胞代谢的重要介质,是活性氧(ROS)的产生者和靶点,是ATP水平和钙稳态的调节剂,也是参与氨基酸、脂质和核苷酸合成的生物合成途径的枢纽。线粒体存在于所有细胞中,它们的大小、形状和数量不同,这取决于细胞、基础组织和其他一些因素的代谢需求。考虑到它们在细胞和机体功能中的关键作用,在许多遗传和非遗传疾病以及癌症和衰老中观察到线粒体(mt)功能障碍并不奇怪。在绝大多数情况下,mt功能障碍的显著特征包括mt膜电位(mtmP)、mt质量和氧化...

  • 29 2019-10
    标准胎牛血清血源

    目前国内标准胎牛血清的主要指标有以下几点:1、内毒素标准为不高于5EU/ml。内毒素是细菌破碎后细胞壁的成分,因此内毒素含量的高低可表现出采血到生产一系列过程中的无菌操作情况。目前,国产血清基本都能达到这一要求,很多进口胎牛血清内毒素含量反而更高,如Gibco26140,只要求不高于50EU/ml,高出我国标准10倍,即使是16000,也要10EU/ml,血清质量也未见影响。可见,内毒素含量偏高不影响质量,除非含量*,预示着已经污染。2、总蛋白含量胎牛血清一般范围是30-40...

  • 16 2019-10
    让细胞培养不再为难新手

    让细胞培养不再为难新手作者:毕老师细胞培养起初对于我这种“女汉子”性格的人来说,着实是枯燥的工作,因为面对的细胞,它不会说话不会笑不能对你有任何回应,而且对于喜欢外科喜欢拿刀的我来说,细胞培养更像是个内科医生做的事情,每天换液就如同换药,它污染了就需要上各种抗生素来“抢救”它。。。。。。可是随着一天天的相处,一天天的用心体会,我渐渐发现原来细胞培养也是一项十分有意思的工作,下面将我的一些经验分享给大家。换液:从培养箱中取出培养瓶;用吸液管将瓶的废液全部吸出(在培养瓶的左下角吸...

  • 16 2019-10
    干货 | 培养液选配 7 个关键点,太实用了!

    干货|培养液选配7个关键点,太实用了!作者:毛博培养液是人工模拟细胞体内生长的生存环境,对于细胞培养起着关键性作用。在这方面,毛博(文章作者)走了弯路之后得到一些宝贵的经验和教训,都是来自实战一线的干货,字字血声声泪,先贡献给大家。培养基,原配的总是合适的选择培养基没有一定的标准,某种培养基可以适合多种细胞,某种细胞也可以在不同培养液中生长。但是,建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞firstchoice培养基。可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询。例如,小鼠细胞株...

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