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实验动物之所以能撑起科研界的半壁江山，主要是因为他们屡次在医学界中建下奇功，而且无论是生物医学领域中的临床研究还是实验室研究，其重大发现均离不开实验动物。那神马才是实验动物呢？简言之，就是经Scientists特殊饲养的动物，比如呆萌小鼠、娇小斑马鱼等等，而不同的实验目的，为其代言的实验动物自然也不同。1177实验动物们肩负着非常重要的使命，并积极献身于科研实验，不仅促进了医学科学的迅速发展，也解决了许多以往不能解决的实际问题和重大理论问题。1178像我们小鼠，凭借着小型啮齿...
作者：麦子今天让我们来谈谈动物实验缺陷，小鼠身上看上去很有希望的疗法，通常很少在人体起到同样的作用，这一点已不足为奇。但往往，在一种小鼠中成功的实验性治疗方案甚至不能在其他小鼠中起效，即实验结果难以重现，这表明许多啮齿动物研究可能会从一开始就有缺陷。“我们都认为小鼠看上去比较简单，但实际问题要复杂的多。”耶鲁大学的兽医神经病理学家CarolineZeiss说道。研究人员很少报道如老鼠的食物、垫料或光照等微妙的环境因素；因此，尽管大量的研究表明这些因素可以显著影响动物的生物学，...
作者：毛博酶联免疫吸附实验，简称为ELISA。正好是一个美丽的女孩的名字。日本有位女艺人野田绘理纱，英文名字就叫Elisa。694ELISA实验是一种非常经典的免疫学实验。虽然历史非常悠久了，但是还是不断地在临床和基础研究中得到应用。其主要用于：免疫酶染色各种细胞内成份的定位；研究抗酶抗体的合成；显现微量的免疫沉淀反应；定量检测体液中抗原或者抗体成份。毛博做过一段时间的ELISA，总结了一些经验教训。毛博还是采用一贯的套路：问题，可能的原因，解决方法。供大家参考。问题1：阳性...
作者：子非鱼免疫组化（IHC），此种大气上档次的实验自然深得科研者的宠爱。然而做过该实验的人都知道，IHC看似容易，但其花样百出的问题总是让实验汪们的精神备受摧残，苦不堪言。本文就对免疫组化进行抽丝剥茧的剖析，还其一片净土。675IHC反应实验流程IHC常见的8大疑问Q1：冰冻切片和石蜡切片如何取材？Answer:冰冻切片取材可分为两种情况：6766771）动物灌流固定：如小鼠心脏灌流，首先采用预冷的1×PBS灌流冲洗直至血液全部放出，随后灌注4%PFA直至小鼠僵直，而后解剖...
作者：毛博669670很多时候，我们千辛万苦地染出了一张张漂亮的免疫组化片子。但是却不知道如何正确地分析，得出理想的结果。这实在是一件憾事。其实，免疫组化结果分析的protocol教科书和实验手册上面都有。今天主要谈谈应该注意的一些事项和技巧，并且有独门绝招献上，都是干货哟。对照染色和做实验的时候必须设立对照组一样，免疫组化也必须设立对照染色。没有对照染色的免疫组化结果是不可信的。对照一般有阳性组织对照，阴性组织对照，阴性试剂对照，自身对照。一般来说，有一个阳性组织对照和一个...
作者：毛博665全国江山一片红，这可不是阅兵日的朋友圈，而是在做免疫组化啊！好好的一张片子染得脏脏的。一下子整个人都不好了。这里，毛博根据自己做免疫组织化学近10年的经验和体会（被师弟师妹称为免疫组化王子，哈），总结出了导致非特异性染色的八个大坑，以及避免掉坑里的一些做法。皆是独门绝技，不要眨眼咯！1.抗体问题，真的是一分钱一分货啊！一抗用多克隆抗体容易出现非特异性染色，建议用高纯度，高效价的针对更具特异性抗原决定簇的单克隆抗体来解决。单克隆抗体很贵，不过结果真的很好。尤其是...
作者：花花是个学术张花花相信大家对IHC一定不陌生，世界那么大，实验方法层出不穷，但是免疫组化却是经典中的经典，想看看别的高大上的技术？不急，我们先来复习复习免疫组化。免疫组化，免疫组织化学技术（immunohistochemistry），是一项利用抗原抗体反应，通过使标记抗体的显色剂显色来确定组织细胞内抗原，对蛋白定位，定性的实验技术。免疫组化主要用的是组织标本和细胞标本两大类，组织标本包括石蜡切片（病理切片和组织芯片）和冰冻切片。石蜡切片，对组织形态保存好，保存时间也长，...
重组质粒的连接、转化及筛选概述质粒具有稳定可靠和操作简便的优点。如果要克隆较小的DNA的片段(＜10kb)且结构简单,质粒要比其它任何载体都要好。在质粒载体上进行克隆,从原理上说是很简单的，先用限制性内切酶切割质粒DNA和目的DNA片段,然后体外使两者相连接,再用所得到重组质粒转化细菌,即可完成。但在实际工作中,如何区分插入有外源DNA的重组质粒和无插入而自身环化的载体分子是较为困难的。通过调整连接反应中外源DNA的片段和载体DNA的浓度比例,可以将载体的自身环化限制在一定程...
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