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为什么多能干细胞大有前途?人类多能干细胞具有自我更新能力并且具有分化成为任何细胞类型的潜力,帮助克服现有动物模型中对某些疾病的限制。虽然动物模型长久以来被用于研究疾病的不同发育阶段,但该类模型并不完美,比如,动物模型心脏的尺寸以及静息心率与人类有很大的差异,在一些情况下某些疾病的表型可能是无法准确呈现。此外,病人来源的人类细胞的培养虽也逐渐被用于科学研究以及医疗发展。但是从病人血液或者组织中分离得到的这些细胞系很难持续的培养,同时特定的细胞系也很难从中分离得到。人类多能干细胞...
由于co-IP相对问题较多,以co-IP为例进行介绍。Step1固定抗体Step2加样Step3结合,去除非特异性蛋白Step4靶蛋白(红色)洗脱或者互作蛋白复合物(红色+黄色)洗脱Step5分析检测—WesternBlot或者质谱常用“黑话”上图证明了EDR1和EDR4有相互作用。如果想要设计好实验,让我们先弄清以下“黑话”的意思吧。阳性对照:证实细胞裂解物中确实存在靶蛋白(IP)或者互作蛋白对(co-IP,比如诱饵蛋白X和靶蛋白Y),即为常说的input。可直接取抽好的蛋...
某个实验间隙…萌新:开题报告已提交,转眼1个月过去了,实验还是一头雾水,为啥我的co-IP拉不下来蛋白?奋斗中的师兄:我当初正好相反,拉下来的蛋白被抗体条带覆盖住了,换个抗体忒不好找,无奈换了个蛋白,还好挺顺利。久经沙场的大师兄:蛋白吧,不但种类多,理化性质差异较大,关键它们又喜欢组队在细胞里干活,co-IP又是常用的手段,掌握好这个工具还是很重要的,总不能随随便便就换个蛋白。IP、co-IP、pull-down简介IP(Immunoprecipitation),免疫沉淀:是...
活细胞荧光成像往往需要更长时间的观察和拍摄,对荧光信号的持久稳定要求更高。这就需要研究者要选用更明亮更稳定的荧光染料,如Invitrogen™MolecularProbes™荧光标记试剂,同时尽可能优化实验条件。除此之外,提高活细胞成像的信噪比还可通过使用能减少细胞外背景荧光或增加标记荧光染料光稳定性的试剂进行信号优化。降低背景荧光活细胞成像实验中非常重要的一点是需要在专门的培养基中进行成像。常规培养基含有酚红可淬灭可见光波段的荧光染料,或含有自发荧光...
巨噬细胞是先天免疫系统的一种特殊的、长寿命的吞噬细胞。巨噬细胞是三种吞噬细胞类型之一,还有粒细胞(中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞)和树突状细胞(DCs)。大多数病原体通过呼吸道、肠粘膜、皮肤病变或泌尿生殖道进入宿,NOI个遇到的就是在粘膜下组织中的巨噬细胞,它们通常是NOI个遇到病原体的防御细胞。一旦微生物进入宿主并开始复制,它就被其中一种吞噬细胞所识别,并被吞噬形成吞噬溶酶体,然后再经过酸化和酶处理,产生高活性一氧化氮和超氧自由基来杀死病原体,这一过程称为吞噬作用。...
细胞自噬(Autophagy)对细胞正常行使功能至关重要,涉及细胞稳态、发育、细胞死亡、应对侵入等,各种自噬相关研究也一直备受关注。自噬早提出于20世纪60年代,在2016年,诺贝尔生理学和医学奖授予了在自噬性溶酶体研究作出贡献的日本分子细胞生物学家大隅良典(YoshinoriOhsumi)。在疫情来袭,科学家争相探寻有效治疗药物时,也有研究者关注细胞自噬和病毒感染的关联。超博推荐-赛默飞品牌-可提供一系列关于细胞自噬及其机制研究的工具,包括Invitrogen™...
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一、ELISA试剂盒的注意事项:1、严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温标准。使用后立即冷藏保存试剂。2、洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。3、消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。4、底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。5、避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。6、在储存和温育时避免强光直接照射。7、平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板...
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