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技术文章
  • 18 2021-1
    涨知识了,ELISA试剂盒的性能优势

    一、ELISA试剂盒的性能优势:1、ELISA试剂盒将特定抗体(一抗)结合到某种固相载体表面,并保持其免疫性。一抗是待测抗体的抗体,识别待测抗体。2、二抗是一种与酶偶联的抗体,既保留了其免疫活性,又保留了酶的活性。二抗识别并结合待测抗体。3、测定时,固定的一抗先与样品稀释液反应,将样品中待测抗体固定;洗涤后再与二抗反应。每一步之间都要进行洗涤。4、加入底物,酶作用底物,使之变色。底物被酶催化变为有色产物。5、产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅有无定性...

  • 5 2021-1
    小老鼠实验呀(!!!)

    灌胃给药后,为何我的小鼠频繁死亡?从新药研发角度来说,因口服给药是经济的方式,在研究中。动物实验中,灌胃是口服给药的方法,然而,看似简单的几步,可对于初学者因为手法不当而伤到气道或食道,进而引起小鼠死或者逐渐消瘦至死亡。那么在灌胃的实验中,我们究竟该掌握哪些注射手法和技巧呢?下面1起来看看!灌胃:借助器械(灌胃针)将药物直接灌入动物胃内;药物循环途径:食管→胃→小肠→小肠毛细血管(吸收入血)→空回肠静脉→肠系膜上静脉→肝门静脉→肝→肝静脉→下腔静脉→右心房→右心室的吸收进入血...

  • 18 2020-12
    PSC培养:从血清到成分更明确的系统? 不再傻傻分不清

    人胚胎干细胞(ESC)初由干细胞研究JamesThomson等人于1998年获得,在当时的研究中,他们将ESC培养在有丝分裂灭活的小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)上,并使用添加20%胎牛血清(FBS)及其他成分的培养基[1]。这项开创性的工作成为开发各种多能性干细胞(PSC)培养系统的起点。为了降低异种蛋白和外来物质的污染风险,人们将MEF替换为人源的细胞,包括人成纤维细胞[2–4]。为了进一步减少可变成分和动物性原料,人们将FBS替换为GibcoKnockOut血清替代物(Kn...

  • 16 2020-12
    ST30-3302胎牛血清的概述及优势

    一、ST30-3302胎牛血清的概述:1、血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。2、血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。二、ST30-3302胎牛血清的优势:1、牛血清是细胞培养中用量大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必需的营养成份,常用于动物细胞的体外培养...

  • 14 2020-12
    如何高效又稳定的构建干细胞疾病模型?

    为什么多能干细胞大有前途?人类多能干细胞具有自我更新能力并且具有分化成为任何细胞类型的潜力,帮助克服现有动物模型中对某些疾病的限制。虽然动物模型长久以来被用于研究疾病的不同发育阶段,但该类模型并不完美,比如,动物模型心脏的尺寸以及静息心率与人类有很大的差异,在一些情况下某些疾病的表型可能是无法准确呈现。此外,病人来源的人类细胞的培养虽也逐渐被用于科学研究以及医疗发展。但是从病人血液或者组织中分离得到的这些细胞系很难持续的培养,同时特定的细胞系也很难从中分离得到。人类多能干细胞...

  • 10 2020-12
    co-IP实验

    由于co-IP相对问题较多,以co-IP为例进行介绍。Step1固定抗体Step2加样Step3结合,去除非特异性蛋白Step4靶蛋白(红色)洗脱或者互作蛋白复合物(红色+黄色)洗脱Step5分析检测—WesternBlot或者质谱常用“黑话”上图证明了EDR1和EDR4有相互作用。如果想要设计好实验,让我们先弄清以下“黑话”的意思吧。阳性对照:证实细胞裂解物中确实存在靶蛋白(IP)或者互作蛋白对(co-IP,比如诱饵蛋白X和靶蛋白Y),即为常说的input。可直接取抽好的蛋...

  • 9 2020-12
    IP、co-IP、pull-down?

    某个实验间隙…萌新:开题报告已提交,转眼1个月过去了,实验还是一头雾水,为啥我的co-IP拉不下来蛋白?奋斗中的师兄:我当初正好相反,拉下来的蛋白被抗体条带覆盖住了,换个抗体忒不好找,无奈换了个蛋白,还好挺顺利。久经沙场的大师兄:蛋白吧,不但种类多,理化性质差异较大,关键它们又喜欢组队在细胞里干活,co-IP又是常用的手段,掌握好这个工具还是很重要的,总不能随随便便就换个蛋白。IP、co-IP、pull-down简介IP(Immunoprecipitation),免疫沉淀:是...

  • 8 2020-12
    CB-如何让活细胞成像的荧光信号明亮且稳定?

    活细胞荧光成像往往需要更长时间的观察和拍摄,对荧光信号的持久稳定要求更高。这就需要研究者要选用更明亮更稳定的荧光染料,如Invitrogen™MolecularProbes™荧光标记试剂,同时尽可能优化实验条件。除此之外,提高活细胞成像的信噪比还可通过使用能减少细胞外背景荧光或增加标记荧光染料光稳定性的试剂进行信号优化。降低背景荧光活细胞成像实验中非常重要的一点是需要在专门的培养基中进行成像。常规培养基含有酚红可淬灭可见光波段的荧光染料,或含有自发荧光...

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