干货 | 培养液选配 7 个关键点，太实用了! 
                                                               作者：毛博 
培养液是人工模拟细胞体内生长的生存环境，对于细胞培养起着关键性作用。在这方面，毛
博（文章作者）走了弯路之后得到一些宝贵的经验和教训，都是来自实战一线的干货，字字血声声泪， 先贡献给大家。 
  

 
                                                  培养基，原配的总是合适的 
 
选择培养基没有一定的标准，某种培养基可以适合多种细胞，某种细胞也可以在不同培养液
中生长。但是，建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞first choice培养基。可以查阅
参考文献，或在购买细胞株时咨询。例如，小鼠细胞株多选 1640；进行细胞杂交，基因转移 实验，可选择 IMDM。 另外，本实验室用惯了的培养基不妨一试。这些都是师兄师姐们用 了几十年了。肯定好用的。  
  
                                            1640 还是 DMEM，取决于你发文章的决心 

1640 的确是非常便宜的培养基，也很好用。所以在国内的实验室中，用的非常非常多。但 是，它的缓冲力弱，所以有时会对细胞的生长状态有影响，尤其是一些实验室长期传代状 态不好的细胞。所以，毛博很败家地推荐：为了早点出文章，有条件还是用 DMEM，当然不 是昂贵的 GIBCO 公司的，实在是太贵了。HYCLONE 的砍砍价，干粉很便宜，但是明显杂质和 质量不如 GIBCO。一分价钱一分货。真的是真理哈。 
  
                                                         2 到 3 周的量，多了也是浪费 
 
一旦在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时，应该在 2 到 3 周内用完它。因为，一些抗生素 和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。2-3 周后就降解完了。所以，一次少配一点，就 不要偷懒了。 
  
                                                                    慎用碳酸氢钠 
 
培养基的 pH 值随着碳酸氢钠量的增加，呈抛物线增长，当碳酸氢钠加到一定量时，pH 变化 越来越小。而培养基的渗透压值随着碳酸氢钠量的增加，呈直线增长，碳酸氢钠量越大，渗
培养基变成了高渗溶液，细胞会脱水萎缩滴。 
  
                                                                     血清分装防膨胀 

必须贮存于–20 ～ -70℃，若存放于 4℃，如同第三条所说的，2～3 周就降解了。教大家一 个小窍门：可将 1 瓶 500ml 的血清，每次 40～45 ml 分装于无菌 50 ml 离心管中，由于血清 结冻时体积会增加约 10 %， 必须预留此膨胀体积 5～10ml，否则会把离心管冻裂滴。  
  
                                                                  血清解冻，慢是* 

血清的解冻和细胞的解冻正相反：细胞是越快越好；血清是越慢越好。血清解冻步骤: -20℃ 或–70℃冰箱拿出来，放到 4℃冰箱，放一天。在这一天中，时不时地去摇晃一下，使温度与 成分均一，减少沉淀的发生。一天过后，拿出来放到室温下，等血清恢复室温了，再分装。  
 
                                                                  热灭活？别上它的当！ 
 
掌握一条原则：除非必须，一般不要热灭活，因为会造成沉淀物显著增多，且会影响血清的 品质。这些沉淀物在显微镜下观察，像是“小黑点”，常常误以为是血清遭受污染，又去过滤 呀什么的，无端增加没有必要的工作量。这里毛博提醒大家：一般不要热灭活。