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一文读懂:gibco澳洲胎牛血清的使用方法和保存方法

发布时间:2019-12-02浏览:123次

   gibco澳洲胎牛血清的使用方法:

  在细胞培养过程中,经常加入的胎牛血清,常使用gibco澳洲胎牛血清浓度是10%。高浓度的血清可能改变细胞的基因表达谱,影响后续实验的结果,我们在实验中使用10%的gibco澳洲胎牛血清培养293T细胞,效果非常好。但是有些细胞也会使用5%的GibcoFBS或者20%的gibco澳洲胎牛血清,要根据具体细胞选择合适的gibco澳洲胎牛血清浓度。
  gibco澳洲胎牛血清的保存方法:
  1、需要长期保存的gibco澳洲胎牛血清必须储存于低温冰箱中。冰箱中保存时间切勿超过1个月。切勿将血清在高温放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会被破坏,而影响血清质量。如果一次无法用完一瓶,可将分装于无菌50ml离心管中。由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。
  2、一般厂商提供的gibco澳洲胎牛血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清。
  3、瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室温,待全部溶解后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。
  4、热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻的血清。加热过程中须规则摇晃均匀,此热处理的目的是使血清中的补体成分灭活,除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量。补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞收缩,肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。
  5、gibco澳洲胎牛血清中的沉淀物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量。可用离心,5分钟去除,也可不用处理。显微镜下“小黑点”:经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察象“小黑点”,常误认为血清受污染。一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清。

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