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技术 | 还在 2D 细胞培养?Out 了,3D 培 养玩起来!

发布时间:2019-10-16浏览:148次

                           技术 | 还在 2D 细胞培养?Out 了,3D 培 养玩起来! 
                                                               作者:燕子 
你的细胞是养在哪儿呀?......不就是塑料的细胞培养皿中吗?圆的,方的,长的随你选俺都 有! 
 
那你的组织实验和细胞实验结果都能一致吗?嗯嗯,大部分还是能的,那另一部分呢?我也 不知道嘞!做了好多遍的!

其实呢,我们在细胞水平的研究大部分呢还是在 2D 水平的,然而细胞在体内生活的环境远 远复杂的多。3D 细胞培养相比 2D,优势就很明显,更接近细胞的体内状态,能够提高细胞因 子、抗体和其他分子的产量,测试剂盒已经到了 ρg 级细胞因子测不到心酸再也不会有了! 在 3D 体系内干细胞能够有效的分化,基因表达、细胞活动与体内过程更接近。 

 建立 3D 细胞体系,听上去很复杂的样子;现在就用模拟肺环境为例,介绍一下肺部 3D 体 系建立。 
 Immunocompetent 3D Model of Human Upper Airway for Disease Modeling and In Vitro 
Drug Evaluation 
 建立上皮细胞&纤维原细胞共培养体系 
 ES 支架切割成 2cm2 每小块,放置距离紫外光源 8cm 处灭菌 15min,每一面都需要这样操作
灭菌哦。切割好的支架移入 12 孔板中(无菌操作),将一个钢圈放置在支架上,加抗生素再 进一步灭菌,放入恒温孵箱过夜。吸去抗生素,用 PBS 清洗,后加细胞培养液浸没支架。在 支架支撑物里上皮细胞支架放在纤维原单层细胞支架上形成 2D 共培养模型。 

 

图:钢圈圈定细胞接种的面积;支架支撑物放在 2D 气-液界面(白色圆柱)里,支架在类 似肺组织在适当的条件(ECM)下培养(上皮细胞在上层和成纤维细胞浸没),模仿体外肺 组织环境。以防在培养过程中下拨分离或移动,支架固定在特有的支撑物上。细胞在培养 基(目标细胞所用培养基)中孵育。 

 

                                      建立上皮&树突&纤维原细胞 3D 共培养 


 

上皮细胞&纤维原细胞共培养体系在孵箱中孵育 14 天后插入树突细胞支架,培养基仍为混 合培养基。上皮&树突&纤维细胞 3D 体系培养 14 天,使其形成更似生理环境的细胞间联系。 
 
接下来你想研究肺部哪个病,哪个药,哪种细胞就放进去相互作用吧! 

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