技术 | 还在 2D 细胞培养？Out 了，3D 培 养玩起来！ 
                                                               作者：燕子 
你的细胞是养在哪儿呀？......不就是塑料的细胞培养皿中吗？圆的，方的，长的随你选俺都 有！ 
 
那你的组织实验和细胞实验结果都能一致吗？嗯嗯，大部分还是能的，那另一部分呢？我也 不知道嘞！做了好多遍的！

其实呢，我们在细胞水平的研究大部分呢还是在 2D 水平的，然而细胞在体内生活的环境远 远复杂的多。3D 细胞培养相比 2D,优势就很明显，更接近细胞的体内状态，能够提高细胞因 子、抗体和其他分子的产量，测试剂盒已经到了 ρg 级细胞因子测不到心酸再也不会有了！ 在 3D 体系内干细胞能够有效的分化，基因表达、细胞活动与体内过程更接近。 

 建立 3D 细胞体系，听上去很复杂的样子；现在就用模拟肺环境为例，介绍一下肺部 3D 体 系建立。 
 Immunocompetent 3D Model of Human Upper Airway for Disease Modeling and In Vitro 
Drug Evaluation 
 建立上皮细胞&纤维原细胞共培养体系 
 ES 支架切割成 2cm2 每小块，放置距离紫外光源 8cm 处灭菌 15min,每一面都需要这样操作
灭菌哦。切割好的支架移入 12 孔板中（无菌操作），将一个钢圈放置在支架上,加抗生素再 进一步灭菌，放入恒温孵箱过夜。吸去抗生素，用 PBS 清洗，后加细胞培养液浸没支架。在 支架支撑物里上皮细胞支架放在纤维原单层细胞支架上形成 2D 共培养模型。 

图：钢圈圈定细胞接种的面积；支架支撑物放在 2D 气-液界面（白色圆柱）里，支架在类 似肺组织在适当的条件（ECM）下培养（上皮细胞在上层和成纤维细胞浸没）,模仿体外肺 组织环境。以防在培养过程中下拨分离或移动，支架固定在*的支撑物上。细胞在培养 基（目标细胞所用培养基）中孵育。 

                                      建立上皮&树突&纤维原细胞 3D 共培养 

上皮细胞&纤维原细胞共培养体系在孵箱中孵育 14 天后插入树突细胞支架，培养基仍为混 合培养基。上皮&树突&纤维细胞 3D 体系培养 14 天，使其形成更似生理环境的细胞间联系。 
 
接下来你想研究肺部哪个病，哪个药，哪种细胞就放进去相互作用吧！