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人急性T淋巴细胞白血病细胞

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人急性T淋巴细胞白血病细胞

1. 人急性T淋巴细胞白血病细胞液体培养基的保存是冷藏好?还是冷冻好?

  要冷藏!!因为液体培养基经冷冻后再经溶化时,其溶液的pH值会发生改变,溶液往往变碱,某些成分溶解也会受到影响对细胞生长不利。故液体培养基一定要存放在冷藏箱中,通常液体培养基在冷藏条件下可存放6个月 ~ 一年。

  2.人急性T淋巴细胞白血病细胞 液体培养基中谷氨酰胺的作用,及使用方法。

  几乎所有的细胞对谷氨酰胺有较高的要求,细胞需要谷氨酰胺合成蛋白质,在缺少谷氨酰胺时,细胞生长不良而死亡。所以,各种培养液中都含有较大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置-20 ?C冰冻保存,用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4 ?C 冰箱储存两周以上时,应重新加入原来量的谷氨酰胺。基础医学细胞中心在其服务项目中配制分装了高浓度(100倍)的谷氨酰胺溶液(1ml/支)。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml*培养基中,其终浓度为2mM/ml培养基。包装为粉红色,-24?C保存。

  3. 人急性T淋巴细胞白血病细胞 培养用液pH对细胞生长的影响

  由于,大多数细胞适宜pH为7.2~7.4,偏离此范围对细胞将产生有害的影响。各种细胞对pH的要求也不*相同,原代培养细胞一般对pH变动耐受差,无限细胞系耐受力强。

  但总体来说,细胞耐酸性比耐碱性强一些,偏酸环境中更利于细胞生长。因此,我们在配制培养用液时,可把液体的pH稍微调得偏酸一些。液体在经过0.10um或0.22um滤膜过滤时,溶液的pH还会向上浮动0.2左右。

  4.人急性T淋巴细胞白血病细胞 细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗?

  不见得!因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下,pH 8.0 , 温度 37 oC 其作用能力zui强。另外,钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前,一定要用D-Hanks液或PBS液反复冲洗细胞培养瓶,以便于将含血清的培养基冲洗干净,这样就能大大提高消化液的消化能力。本中心通常使用的消化液浓度为:

  (1)0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA;

  (2)0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA。

  (3)0.25% 胰蛋白酶

  溶液pH8.0~9.0;使用D-Hank液配制。

  多数细胞传代消化可使用0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA这种消化液。
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