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人肺腺癌细胞

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人肺腺癌细胞1. 不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子,觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑?知道为什么吗?烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸氢跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候,炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后,空气变冷,压力骤降,培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳,释放出来。培养基中的碳酸少了,当然会变碱。如果不烧瓶口的话,你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱,因为室温还是比冰箱内的温度高)

其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下,你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话,这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌,除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来美国以后发现这里更*,超净台内根本就不点酒精灯。

2. 不要频繁看细胞。SPC-A-1人肺腺癌细胞对于初学者而言,养细胞就像养孩子一样,有空就要去看看。细胞越是养不好,就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处,特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后,密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围,形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞,培养瓶这么一晃,把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞,细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管,细胞疯长。

3. 不要怕消化。在传代的时候,初学者往往生怕细胞消化过度,早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯,吹得满瓶子都是气泡。在我看来,用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候,37度消化过夜,细胞也没事。我一般是等细胞*变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有,动作要轻柔,尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大,对细胞的伤害也是很大的。"    详见细胞说明书

    传代方法:    建议1:2-1:3 两天换液一次

    冻存条件:    详见细胞说明书

    主要文献:    请具体查阅相关发表文章

细胞培养相关培养基选购基本指南:
如何选择培养基:经常听到有人问,这种细胞该用哪一种培养基呢?其实这个问题的答案可以很简单,也可以好复杂。为什么这样说呢?如果这种细胞是购自一些细胞库,那很简单,问供应商就行了。或者找到相关的文献,作为参考。
培养基这么多种,要选择起来也是个头疼的事情。除了部分培养基是公开配方的,或者是专门针对某一种细胞的,如昆虫基本培养基和神经祖细胞基础培养基, 但是大部分液体培养基都是专li配方的,也就是说其中的成分是保密的。那么你只能是检索文献、让供应商推荐,然后用自己的细胞做几次传代培养来选出*合适的培养基。毕竟实践出真知。
怎么样才可以买到好的培养基产品:*先,当然需要找对品牌,其次是找对自己所在区域的品牌代理商,针对自己所养的细胞,供应商该选用哪种的培养基进行培养,这样就可以买到好的而且适合自己的培养基产品。
关于培养基品牌,目前公司所知道的高校实验室有些同学在用Corning系列培养产品,也有同学在用Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等品牌的产品。

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