人胃癌细胞 五氟尿嘧啶耐药株

人胃癌细胞 五氟尿嘧啶耐药株客户收到细胞先不开盖，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议受收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各一张），排除细胞本身污染的情况；

一、 细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满*培养液并封好瓶口是细胞运输的*办法。从细胞资源中心获得细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作。

二、 镜下观察：

未超过80%汇合度时，将瓶装的*培养液移入无菌瓶中，留待日后培养用，原瓶（T25瓶）保留6-8ml*培养液，放入37℃、5%CO2孵箱培养；

超过80%汇合度时，按要求比例消化传代。

三、消化方法

1、将瓶装的*培养液移入无菌瓶中，留待日后培养用。加消化液0.25% Trypsin-EDTA (1X), Phenol Red消化。

2、T25瓶加3ml PBS，洗一次，弃上清，再加1ml消化液消化，显微镜下观察，等细胞*脱离瓶壁分离成单个后，加培养基混匀，离心收集，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6， 1:6-1:8），每T25瓶加培养基至6-8ml，37℃、5%CO2孵箱培养人胃癌细胞 五氟尿嘧啶耐药株