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大鼠胰岛细胞瘤细胞

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详细介绍
品牌自营品牌供货周期一周
应用领域医疗卫生,环保,化工,生物产业,农业

大鼠胰岛细胞瘤细胞

一.培养基及培养冻存条件准备:

  1. 准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%,添加50 μmol/L β-巯基乙醇
  2. 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度培养箱湿度为70%-80%。
  3. 冻存液90%完全培养基,10%DMSO现用液氮储存。
  • 细胞处理
  1. 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中加入8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
  2. 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%可进行传代培养

对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

  1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子PBS润洗细胞1-2
  2. 加2ml消化液0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化
  3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
  4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中

3)细胞冻存:细胞生长状态良好时,进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO进行冻存

大鼠胰岛细胞瘤细胞注意事项: 
1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系
2. 所有动物细胞均视为潜在的生物危害性必须在二级生物安全内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
 

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