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基因编辑T7 核酸内切酶I

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详细介绍

基因编辑T7 核酸内切酶I

T7 Endonuclease I

T7 核酸内切酶I

高检测灵敏度高

产物可直接电泳检测

T7 Endonuclease I 是克隆重组T7 Endonuclease I基因后在大肠杆菌中表达纯化的高活性蛋白,能识别并切割不完全配对DNA、十字型结构DNA、Holliday结构或DNA 分叉点、异源双链DNA 及低速切割带切刻位点的双链DNA。酶切位点为错配5’ 端的一、二或三个磷酸二酯键。

组分

EN303-01(250 U)

EN303-02(1,250 U)

T7 Endonuclease I

25 μl

125 μl

T7 Endonuclease I Reaction Buffer(10 x )

1 ml

1 ml

Control template

10 μl

20 μl

-20℃保存

基因编辑T7 核酸内切酶I

 

Q1:做基因编辑,酶切验证编辑成功,但是测序结果却不正确(假阳性)。

A1:编辑完成之后,提取基因组,做PCR扩增目的片段,利用T7核酸内切酶进行验证,有目的条带,连T载做转化,菌检测序。建议在菌检结束之后,利用菌检产物再做一次酶切验证是否将有效片段连入载体,如果酶切验证是阳性的,则可以测序。

Q2:该实验反应温度的上限是多少?

A2: 反应温度超过42℃时,会增加非特异性核酸酶活性。避免反应温度超过55℃,否则会导致酶活性降低。

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