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Gibco胚胎干细胞专用胎牛血清。

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详细介绍

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使用方法

在细胞培养过程中,经常加入5%-20%Gibco胎牛血清,最常使用的Gibco胎牛血清浓度是10%。高浓度的血清可能改变细胞的基因表达谱,影响后续实验的结果,我们在实验中使用10%Gibco澳洲胎牛血清培养293T细胞,效果非常好。但是有些细胞也会使用5%Gibco胎牛血清或者20%Gibco胎牛血清,要根据具体细胞选择合适的Gibco胎牛血清浓度。

保存方法

1、需要长期保存的Gibco牛血清,例如Gibco南美胎牛血清,必须储存于-20 - 70 低温冰箱中。4冰箱中保存时间切勿超过1个月。切勿将血清在37放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会被破坏,而影响血清质量。如果一次无法用完一瓶,可将4045ml分装于无菌50ml离心管中。由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。2、一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现Gibco牛血清有悬浮物,例如Gibco北美胎牛血清中发现有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清。3、瓶装Gibco胎牛血清南美解冻需采用逐步解冻法:-20 -70 低温冰箱中的血清放入4冰箱中溶解1.然后移入室温,待全部溶解后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装4045ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。.切勿直接将血清从-20进入37解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。4、热灭活是指56, 30分钟加热已完全解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。5、血清中的沉淀物和絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理。 显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染。一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清。

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