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你知道这些细胞自噬标记的好工具吗?

发布时间:2020-11-23浏览:74次

       细胞自噬(Autophagy)对细胞正常行使功能至关重要,涉及细胞稳态、发育、细胞死亡、应对侵入等,各种自噬相关研究也一直备受关注。       自噬最早提出于20世纪60年代,在2016年,诺贝尔生理学和医学奖授予了在自噬性溶酶体研究作出贡献的日本分子细胞生物学家大隅良典(Yoshinori Ohsumi)。在疫情来袭,科学家争相探寻有效治疗药物时,也有研究者关注细胞自噬和病毒感染的关联

     超博推荐-赛默飞品牌-可提供一系列关于细胞自噬及其机制研究的工具,包括Invitrogen™ Molecular Probes™ 的p62及LC3B特异标记染料用以研究自噬活性,使研究人员对细胞自噬与泛素降解机制之间的联系进行深入研究,用于追踪溶酶体并入自噬体的过程,还可以检测蛋白质从合成到通过自噬途径聚集和泛素化的全过程等。

使用LC3B追踪自噬过程

LC3B可从细胞质基质中获得,并与早期自噬过程中的吞噬泡形成有关。这种定位信息可作为自噬膜的常用标记,还可监控其发展变化的过程,实现:

✔ 活细胞及固定细胞中的自噬追踪及定位

✔ 对含LC3B的囊泡进行实时pH监控

✔ 定量分析LC3B的聚积

Premo Autophagy Sensor LC3B-RFP (红)标记U2OS细胞

 

使用p62追踪选择性自噬过程

p62可作为将要被自噬作用降解的小泡的受体,也可作为要被清除的泛素化蛋白聚集物的受体。p62蛋白可结合泛素,也可与LC3结合,从而靶向自噬体并促进泛素化蛋白的清除,可以进行:

✔ 活细胞中的p62追踪

✔ 与细胞标记同时使用进行多色分析

 A549细胞中 p62阳性小泡沿微管分布图像

 

溶酶体定位和追踪

溶酶体与隔离细胞膜融合从而形成自噬性溶酶体,可作为在降解前追踪自噬性溶酶体融合的有效工具,而具有细胞渗透性的LysoTracker染料仅需毫微摩尔级浓度即可标记并在溶酶体内部定位酸性细胞器。

✔ 对酸性细胞器具有高度选择性

✔ 多种荧光颜色可供选择

✔ 可与其他荧光染料或蛋白同时使用进行多色分析

 使用LysoTracker Deep Red共定位HeLa细胞

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