如何解冻sigma试剂血清才不会使产品质量受损
sigma试剂血清取自出生24小时之内的新生牛,血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。
sigma试剂血清含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能,其作用如下:
1.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。
3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。
4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
5.起酸碱度缓冲液作用。
6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
已通过内毒素和血红蛋白检测应用源自凝血的FBS是在真核生物,特别是哺乳动物细胞培养物中z广泛使用的未定义的补充物。
保存sigma试剂血清的方法?
我们建议sigma试剂血清应保存在-5℃至-20℃。需要长期保存的血清必须储存于-20℃至–70℃低温冰箱中。然而,若存放于4℃时,请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶,建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。由于sigma试剂血清结冰时体积会增加约10%,因此,sigma试剂血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。
如何解冻sigma试剂血清才不会使产品质量受损?
我们建议您采用逐步解冻法:将-20℃至-70℃低温冰箱中的血清取出后先置于2℃-8℃冰箱中使之融解,然后移入室温待全部溶解后再分装。在溶解过程中需轻轻规则地摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。如放在37℃解冻,颜色加深,粘稠度也会增加,血清在解冻和热灭活后,应按用量分装并于-20℃保存,避免反复冻融。
sigma试剂血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?
sigma试剂血清中沉淀物的出现有许多种原因,但普遍的原因是由于sigma试剂血清中脂蛋白的变性所造成的,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血渭解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物并不影响血清本身的质量。
若您欲去除这些絮状沉淀物,可以将sigma试剂血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。
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