人套细胞淋巴癌细胞

人套细胞淋巴癌细胞

一、客户收到细胞后需注意事项：

1、收到细胞，请查看瓶子是否有破裂，培养基是否漏出，是否浑浊，如有请尽快联系。

2、收到细胞，如包装完好，请在显微镜下观察细胞。由于运输途中的影响，细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来，显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况，出现此状态时，请不要打开细胞培养瓶，应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止3-5小时左右，让细胞先稳定下，再于显微镜下观察，此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁，请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。

3、收到细胞后，请显微镜下观察细胞，用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多，请离心收集细胞，接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液，使用新鲜配制的*培养液，使用进口胎牛血清。刚接到细胞，若细胞不多时血清浓度可以提高5％去培养。若细胞达到80%左右，血清浓度按照说明书要求进行调配。

4、收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养基吸出，留下 5-10ML培养基继续培养；超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液，1000转/分钟离心3分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基培养，悬浮细胞后移回培养瓶。

5、将培养瓶置于37℃培养箱中培养，盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里，存放于4℃冰箱，以备不时之需。

6、24小时后，细胞形态已恢复并贴满瓶壁，即可传代。（贴壁细胞）将培养瓶里的培养基倒去，加3-5ml（以能覆盖细胞生长面为准）PBS或Hanks’液洗涤后弃去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化，消化时间以具体细胞为准，一般1-3分钟，不超过5分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁，见细胞脱落下来，加入3-5ml培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之*脱落，然后将溶液吸入离心管内离心，1000rpm/5min。弃上清，视细胞数量决定分瓶数，一般一传二，如细胞量多可一传三，有些细胞不易传得过稀，有些生长较快的细胞则可以多传几瓶，以具体细胞和经验为准。（悬浮细胞）用移液管轻轻吹打瓶壁，直接将溶液吸入离心管离心即可。

7、贴壁细胞，悬浮细胞。严格无菌操作。换液时，换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液，37℃，5%CO2 培养。    

    二、培养注意事项：

　　1、实验进行前，无菌室及无菌操作台以紫外灯照射30-60分钟灭菌，以70%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后，再进行下一个细胞系的操作。

　　2、无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流之流通。实验用品以70% ethanol擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在抬面之中央无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操作。

　　3、工作人员应注意自身之安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开的容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。

三、癌细胞究竟是如何"活动"的

一说起癌症，我们首先联想到的就是绝症、死亡之类的词汇。

因为癌症给人们的生命健康造成了巨大的威胁，也给*的科学家们出了一道难题，人类*攻克癌症、治愈癌症的道路还很漫长。

同时我们也知道，癌症也叫恶性肿瘤，癌细胞不是正常的细胞，它会一直疯长，掠夺人体有限的能量供应，后把人体系统搞崩溃死亡。

可能有人不禁要问，癌细胞为什么一直要疯长得停不下来，为什么要“杀死人”，人死了它不也就死了吗？

要想解答这个疑惑，我们就要从癌的来龙去脉开始，进行一番了解。

人只要活着，体内的细胞就会不停分裂，新细胞诞生，老细胞si去，维持着相对的平衡状态。但是，细胞在分裂的过程中，会因外界、本身的原因发生“基因突变”，导致细胞不受控制的分裂，形成癌症。

大量消耗身体营养：癌症在疯长的过程中，需要大量的营养供给，因此许多恶性程度较高的癌症病人往往后期会出现“恶病质”体征。

癌症就好比贪得无厌的“寄生虫”，把身体里的“养分”全都吸收光了，机体就会出现各个脏器功能衰竭，许多癌症患者，后都是这个原因死掉的。因此对于短时间内无缘由消瘦很多的人来说，需要尽早去进行检查。

血管破裂：癌细胞不停地分裂，体积不停地增加，当生长到一定程度时，必然会压迫到器官血管，甚至造成血管破裂，因此血管破裂也是导致死亡的主要原因之一。

各种并发症：一些癌症的转移性很强，比如转移到大脑就会导致大脑功能障碍。另外，癌症还会形成癌栓，一旦脱落就会形成肺栓塞。

治疗的副作用：癌症治疗许多都有副作用 ，比如放疗导致的局部溃烂，化疗导致的骨髓抑制等。

癌细胞能量代谢需要的营养物质主要有：葡萄糖、谷氨酰胺、乳酸、丙酮酸、酮体以及脂肪酸等。其中以葡萄糖为主要的能量来源。

健康细胞一般偏好在充足氧气的供应下将葡萄糖转化为能量物质，而癌细胞的代谢特点则是无需大量氧气的参与。和健康细胞不同，肿瘤细胞的代谢特点是，能量利用率低，但是能够更快速产生能量。

癌细胞的本质决定了癌细胞有*的攫取人体的养分的特性。主要的一些特性有：

生长信号紊乱：在健康组织中，细胞的分裂、静止和“死亡”都是有着严密的调控机制的。而在癌细胞中，细胞的分裂信号持续产生、静止与“死亡”的信号被“关掉”，这就导致癌细胞会出现不断疯长的特性。

促血管生成：血管是提供营养物质的必须途径，为了保证自身的营养充足，癌细胞还会促进血管的生成，因此很多肿瘤组织内血供都很丰富。

逃逸免疫系统攻击：癌细胞还特别的狡猾，在和免疫细胞不断的斗争中会进化自己的伪装能力，欺骗免疫系统将自己认作是正常细胞。

所以癌细胞疯长，是由它自身的特性所决定的。

年龄是癌症发病的重要因素，无论什么性别，超过50岁之后，许多癌症发病率会普遍上升。除了年龄之外，还有一些人更容易得癌，比如：

吸烟喝酒：每吸一口烟都会带来78种明确的致癌物质，这些物质会增加肺部细胞癌变的概率。大量喝酒和消化系统癌症（食道癌、肝癌、结肠直肠癌）有着密切的关联。

缺少运动：越来越多的证据表明，运动过少和许多疾病存在关联，也包括癌症。

不良生活习惯：比如过胖、不健康的饮食习惯（吃霉变食物等）、恶劣的居住环境以及室内污染等。

不体检：其实一些癌症在早期发现是*可以治愈的，对于高危人群来说，进行相应的体检很有必要。

攻克癌症，人们还有很长的路要走。作为普通人更重，要的是“正确认识癌症”。不要被伪科学所迷惑。人套细胞淋巴癌细胞