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PAN 优等胎牛血清FBS-P30-3302

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详细介绍

PAN 优等胎牛血清FBS-P30-3302

 

德国PAA/PAN胎牛血清详细描述:
 1)内毒素含量极低<1UI/ml(国际规定:特级胎牛血清<10 UI/ml),极利于细胞的生长和传代
 2)具有欧洲药品监督委员会(EDQM)颁发的产品证书,符合欧洲药典第1483条规定
 3)GMP条件下生产,具有质量认证体系证书
 4)每个批号血清均具有完整的检验报告
 5)三次0.01 μm无菌过滤处理
 6)进行细菌、支原体、病毒及病毒抗体检测,符合国际动物协会要求
 7)可按客户要求用γ射线照射
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 8)进行细菌、支原体、病毒及病毒抗体检测,符合国际动物协会要求
 9)可按客户要求用γ射线照射

PAN 优等胎牛血清FBS-P30-3302

PAN胎牛血清使用方法

在细胞培养过程中,经常加入5%-20%的胎牛血清,最常使用的PAN胎牛血清浓度是10%。高浓度的血清可能改变细胞的基因表达谱,影响后续实验的结果,我们在实验中使用10%的PAN澳洲胎 牛血清培养293T细胞,效果非常好。但是有些细胞也会使用5%的PAN胎牛血清南美或者20%的PAN胎牛血清,要根据具体 细胞选择合适的PAN胎牛血清浓度。

PAN胎牛血清FBS保存方法

1、需要长期保存的PAN牛血清必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。切勿将血清在 37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血 清中的有效成分会被破坏,而影响血清质量。如果一次无法用完一瓶,可 将40~45ml分装于无菌50ml离心管中。由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留 一 定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。

2、一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接 过滤血清。

3、瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全 部溶解后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程 中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度 与成分均一,减少沈淀的发生。.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而 出现沉淀。

4、热灭活是指56℃, 30分钟加热已完全解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体 成分灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉 淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体 参与反应有:细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞 发生化学趋化和活化。

5、血清中的沉淀物 絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身 的质量.可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理。 显微镜下 "小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物 的形成会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染。一般情况下,此小黑 点不会影响细胞生 长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清。

 

PAN胎牛血清使用中遇到的常见问题总结

一、血清灭活问题。

1、问:加到培养基中的血清必须灭活吗?

答:不是必须的,看做什么实验了。

 

2、问:PAN胎牛血清灭活是56℃ 30分钟吗?

答:如果用于培养大多数的肿瘤细胞,血清一般是不需要灭活的,这样可以有效保存血清中的生长因子。 但是如果用于培养一些表面具有补体受体的细胞,如内皮细胞,血清是 需要灭活,一般是56℃,30min。

 

3、问:我要做滋养细胞培养,胎牛血清要灭活吗?

答:进口的一般都已灭活,国产的不一定,zui好还是灭活一下再用较安全。

 

4、问:我用病毒上清转染细胞,培养用的血清需要灭活吗?因为血清中可能有些补体和抗体,是不是会影 响转染?我想未灭活的血清中含些抗体补体可能会和病毒相结合,影响 转染,正确吗?细胞是单核细胞白血病细胞, 病毒是病毒包装细胞PT67收集的病毒上清。为什么要用无血清培养基加病毒孵育几小时,目的是什么?

答:血清一定要灭活,可以先用无血清培养基加病毒孵育几小时以后再加血清。避免杂蛋白对病毒和宿主 结合过程的干扰,一般是2-6小时,根据细胞的状态决定。血清不一定需 要灭活,灭活的目的是将血清中的补体灭活 !这要根据实际情况而定

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