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简要分析无外泌体胎牛血清的主要用途

发布时间:2023-02-19浏览:503次

  无外泌体胎牛血清适用外泌体研究,无支原体,无内毒素。胎牛血清是大多数细胞培养重要的生长支持物。天然来源的FBS会含有大量的外泌体等囊泡成分。由于FBS来源的外泌体会对研究结果产生巨大干扰,因此,外泌体研究时必须使用去除外泌体后的FBS进行细胞培养。
 
  对于大多数细胞来说,体外培养时所用的标准培养基都必须在基础培养基的基础上外加FBS作为生长添加物。常用的FBS通常来至牛血清,其中含有大量的牛外泌体。这些外泌体含牛的相关蛋白质或miRNA等分子,当研究相关细胞自身分泌外泌体时,牛血清中的外泌体可能会造成严重的背景问题,从而影响或干扰结果的判断。
 
  无外泌体胎牛血清的主要用途:
 
  无外泌体胎牛血清可用于犬MSC来源外泌体的分离:用10%无外泌体胎牛血清、1%双抗、1%L-谷氨酰胺和88%DMEM基础培养基配制培养基,以制得的培养基传代培养MSC,取第3-5代收集上清在4℃,300g离心10min除细胞;收集上清后在4℃,16500g离心20min除去细胞碎片;收集上清后用0.22um的滤膜过滤;收集上清后在4℃,120000g超高速离心90min;去上清后,用生理盐水重悬沉淀,再次以4℃,120000g超高速离心90min;去上清后,用生理盐水重悬沉淀,收集悬液即为犬MSC外泌体制剂。

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